產(chǎn)品信息：

本試劑盒有效期為一年

產(chǎn)品簡(jiǎn)介: 

Bradford 蛋白濃度測定法是目前常用的靈敏度較高的蛋白濃度測定方法之一，其實(shí)驗原理是根據考馬斯亮藍(Coommassie Brilliant Blue)G-250與蛋白質(zhì)的堿性和芳香族氨基酸特別是精氨酸（Arginine） 在酸性介質(zhì)中結合后，溶液轉變?yōu)樗{色，使染料的最大吸收峰從 465nm 遷移到 595nm，且測定的吸光 值與蛋白濃度成正相關(guān)關(guān)系；即可通過(guò)測定蛋白在 595nm 處的吸光度，推算蛋白濃度，進(jìn)而進(jìn)行定量測定。 

本法通過(guò)吸光值，推算蛋白濃度，實(shí)現了蛋白濃度測定的快速性和簡(jiǎn)便性。靈敏度高，比 Lowry 法大約高四倍，測定速度快、簡(jiǎn)單，僅需一種試劑即可，且不受大多數樣品中化學(xué)試劑的影響。

注意事項： 

1. Bradford 染色液使用前，需將其恢復至室溫，有利于提高檢測的靈敏度；并在使用前充分混勻

2. 標準曲線(xiàn)也有輕微的非線(xiàn)性，因而不能用 Beer 定律進(jìn)行計算，而只能用標準曲線(xiàn)來(lái)測定未知蛋白質(zhì)的濃度；為了得到更精確的結果，每個(gè)蛋白梯度和樣品均需做復孔，每次試驗都必須建立標準曲線(xiàn) 

3. Bradford 法測定蛋白濃度對大多數化學(xué)物質(zhì)的兼容性比較好，比如對還原劑 DTT 的兼容性高達 5mM；但會(huì )受到略高濃度的去垢劑影響，需確保 SDS 低于 0.01%，Triton X-100 低于 0.05%，Tween  20/ 60/80 低于 0.015%等 

4. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作

使用說(shuō)明： 

一．配制 BSA 標準品體系（線(xiàn)性范圍 100-1500ug/ml）： 

可參考下表配制不同濃度的標準品梯度 ，并充分混勻，避免氣泡生成：

標準品稀釋液原則上應與為蛋白樣品的溶解液一致，但也可用蒸餾水、生理鹽水或 PBS 進(jìn)行稀釋

二. 蛋白濃度測定： 

（1）分別取 5μl 不同濃度蛋白標準品和待測樣品加入 96 孔板中；若樣品不足，可以用稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)氂涗洏悠废♂尡壤?nbsp;

（2）各孔加入 200μl G250 染色液，充分振蕩混勻，室溫孵育 2-3min 

（3）用酶標儀測定 595nm 處的吸光度

（4）以標準蛋白濃度（ug/ml）為橫坐標，用 OD 值為縱坐標繪制標準曲線(xiàn)，根據測出的待測樣品的 A595 值，即可得出樣品的蛋白質(zhì)濃度，進(jìn)而進(jìn)行定量計算

參考標準曲線(xiàn)：