本試劑盒用于定量檢測小鼠血清、血漿或細胞培養上清液等樣本中天 然和重組 TSLP 濃度。使用前請仔細閱讀說(shuō)明書(shū)并檢查試劑組分。 

檢測原理： 

  本實(shí)驗采用雙抗體夾心ELISA。用抗小鼠 TSLP 單克隆抗體預包被酶 標板，加入適度稀釋的樣本和標準品，其中的 TSLP 會(huì )與其單抗結合， 洗去游離成分；加入生物素化的抗小鼠TSLP 抗體，抗小鼠TSLP 抗體與 結合在單抗上的小鼠TSLP 結合而形成免疫復合物，洗去游離的成分； 加入辣根過(guò)氧化物酶標記的親合素，生物素與親合素特異性結合，洗去未結合的酶結合物；加入顯色劑，若反應孔中有 TSLP，辣根過(guò)氧化 物酶會(huì )使無(wú)色的顯色劑現藍色；加終止液變黃。在 450nm 下測 OD 值， TSLP 濃度與 OD450 值之間呈正比，可通過(guò)繪制標準曲線(xiàn)計算出標本中 TSLP 濃度。

其它實(shí)驗材料(不提供，但可協(xié)助購買(mǎi)) :

1. 酶標儀(450nm) 

2. 高精度可調移液器及吸頭：0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl。 一次檢測樣品較多時(shí)，最好用多通道移液器。 

3. 自動(dòng)洗板機或洗瓶

4. 37℃溫箱 

5. 雙蒸水或去離子水 

6. 坐標紙 

7. 量筒

注意事項： 

1. 試劑盒保存在2-8℃，除復溶后的標準品，其它成分不可冷凍。

2. 濃縮生物素化抗體(2a)、濃縮酶結合物(3a)裝量極少，運輸中顛簸和可能的倒置會(huì )使液體沾到管壁或瓶蓋。使用前請離心處理以使附著(zhù)于管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。

3. 不同批號試劑不可混用。 

4. 為避免交叉污染請使用一次性吸頭。 

5. 終止液和顯色劑具腐蝕性，避免皮膚及粘膜直接接觸，一旦接觸到這些液體，請盡快用大量水沖洗。 

6. 使用干凈的塑料容器配制洗滌液，使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 

7. 洗滌酶標板時(shí)應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

8. 不要用其它來(lái)源的試劑混合或替代該產(chǎn)品的組分，不同批號的試 劑盒組份不能混用，請在有效日期內使用本產(chǎn)品。 

9. 在試驗中標準品和樣本檢測時(shí)建議作雙復孔或三復孔，加入試劑 的順序應一致，以保證所有反應孔孵育的時(shí)間一樣。 

10. 充分混勻對反應結果尤為重要，最好使用微量振蕩器(使用最低 頻率進(jìn)行振蕩)。 

11. 避免操作過(guò)程中酶標板干燥，干燥會(huì )使酶標板上生物成分迅速失 活，影響實(shí)驗結果。 

12. 適當的稀釋樣品，使樣品值落在標準曲線(xiàn)范圍內，根據待測因子 含量高、中、低的不同，建議采用1:100、1:10、1:2稀釋樣品。 如果樣品OD值高于最高標準，適當增加稀釋度并重復檢測。 

13. 標準品稀釋液，操作人，移液方式，洗滌方法，孵育時(shí)間及溫度， 試劑盒批次的不同均可能會(huì )導致結果的差異。 

14. 此法可有效的消除可溶性受體、結合蛋白以及生物樣品中的其他 因素的干擾。