ABW?Matrigengel基底膜基質(zhì)膠在<10°C時(shí)由于沒(méi)有足夠的能量促使共價(jià)鍵結合,故而呈液體狀態(tài);在 22℃至 37℃時(shí),其大分子間的共價(jià)鍵可以快速結合而聚合成膠,呈凝膠狀。固化的基質(zhì)膠不僅作為細胞的關(guān)鍵底物,利于細胞的附著(zhù),為細胞生長(cháng)提供支架和營(yíng)養物質(zhì),還具有與內環(huán)境相似的微環(huán)境,從而幫助細胞的3D生長(cháng)。體外細胞的行為常常受到基質(zhì)膠濃度和完整性的影響,使用基底膜基質(zhì)膠時(shí),需要選擇正確的處理方法和包被方法,這樣才能提高2D和3D培養方法的穩定性和改善細胞的行為。
處理ABW?Matrigengel 的重要條件-保持低溫!
因為ABW?Matrigengel 基底膜基質(zhì)在高于10℃的條件下即會(huì )開(kāi)始成膠,我們推薦分裝和使用基底膜基質(zhì)時(shí)使用基質(zhì)膠分裝低溫指示冰盒(圖4) 、吸頭預冷低溫指示冰盒(圖5) 、移液管、吸頭和離心管。
液體狀態(tài)的ABW?Matrigengel基質(zhì)膜基質(zhì)膠可輕松地進(jìn)行稀釋和其他操作,但需謹記,2至8°C溫度的波動(dòng)可能會(huì )導致ABW?Matrigengel 基底膜基質(zhì)發(fā)生細微的物理性質(zhì)變化。這些變化最終可能會(huì )影響所培養的細胞健康生長(cháng)、分化和運動(dòng)。
溫馨提示
在分裝ABW?Matrigengel 時(shí)
1. 基質(zhì)膠儲存在-20℃時(shí)是穩定的。將基質(zhì)膠分裝為最小使用量(通常為200μL或者500μL)。分裝后放置于-20℃冰箱中儲存備用。請不要儲存在自動(dòng)除霜的冰箱中儲存。
2. 將ABW?Matrigengel基質(zhì)膠插入碎冰中,并放置于4°C冰箱中,在冰上過(guò)夜解凍,這樣能夠使基底膜基質(zhì)膠在穩定的低溫環(huán)境中緩慢充分融化。
3. ABW?Matrigengel置于4°C冰箱中不可超過(guò)一天。
4. 所有需要使用的耗材、工具都必須在冰上預冷后才能使用,所有操作盡可能快速進(jìn)行。
5. 稀釋時(shí)使用冰上預冷的無(wú)血清培養基或者pH7.4的PBS。
ABW?Matrigengel能夠應用于多種細胞培養的條件。因此,在開(kāi)展實(shí)驗前,要先了解不同的包被方法及確認好您的細胞適合哪一種包被方法。選擇哪種包被方法取決于多種因素,包括所使用的材料類(lèi)型(細胞/組織)、相關(guān)粘附要求、2D或3D培養需求。
ABW?Matrigengel的包被方法及說(shuō)明
類(lèi)器官常用細胞因子及小分子化合物
其他常用細胞因子及小分子化合物
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