本文主要針對高爾基體、溶酶體及神經(jīng)元細胞，為大家介紹如何選擇合適的試劑/探針?lè )謩e對它們進(jìn)行染色。

高爾基體的主要功能將內質(zhì)網(wǎng)合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工、分揀、與運輸，然后分門(mén)別類(lèi)地送到細胞特定的部位或分泌到細胞外。高爾基體是完成細胞分泌物（如蛋白）最后加工和包裝的場(chǎng)所。

從內質(zhì)網(wǎng)送來(lái)的小泡與高爾基體膜融合，將內含物送入高爾基體腔中，在那里新合成的蛋白質(zhì)肽鏈繼續完成修飾和包裝。高爾基體還合成一些分泌到胞外的多糖和修飾細胞膜的材料。

內質(zhì)網(wǎng)(ER)和高爾基體主要負責（細胞內脂質(zhì)和蛋白質(zhì)的分類(lèi)），因此，針對這兩個(gè)細胞器的大部分染色探針都是脂質(zhì)或是可以影響蛋白質(zhì)運動(dòng)的化學(xué)物質(zhì)。在活細胞和固定細胞中，ER和高爾基體的扁平膜囊可以用各種親脂探針進(jìn)行染色，然后根據其形態(tài)進(jìn)行區分。

NBD C6-Ceramide是一種熒光鞘脂類(lèi)似物，可用于研究鞘脂轉運和代謝機制。它還可以用于選擇性染色活細胞和固定細胞中的高爾基體。環(huán)境敏感的NBD染料在水中發(fā)出微弱的熒光，但在非質(zhì)子溶劑和其他非極性環(huán)境中熒光增加。

溶酶體（Lysosomes）是動(dòng)物細胞中重要的細胞器, 其存在的完整性與動(dòng)物生理病理均密切相關(guān)。溶酶體是真核細胞中為單層膜所包圍的細胞質(zhì)結構，內部pH 4～5，含豐富的水解酶，具有細胞內的消化功能。新形成的初級溶酶體經(jīng)過(guò)與多種其他結構反復融合，形成具有多種形態(tài)的有膜小泡，并對包裹在其中的分子進(jìn)行消化。因此，溶酶體具有溶解或消化的功能，為細胞內的消化器官。

含有兩類(lèi)維持結構和功能所必需的蛋白質(zhì)：執行消化功能的可溶性溶酶體水解酶和具有更復雜功能的溶酶體膜蛋白。

約60種酸性水解酶，包括蛋白酶、脂肪酶、核酸酶，需要由ATP驅動(dòng)的質(zhì)子泵與其他離子通道合作來(lái)維持酸性環(huán)境（pH~4.5）才能發(fā)揮作用。

多種溶酶體膜蛋白，例如LAMP1，LAMP2，LIMP2，v-ATPaes和ASM。其中，LAMP1和LAMP2是最豐富的溶酶體膜蛋白，對代謝、生物發(fā)生、信號轉導和細胞穩態(tài)至關(guān)重要。

溶酶體的主要作用消化作用，是細胞內的消化器官，細胞自溶，防御以及對某些物質(zhì)的利用均與溶酶體的消化作用有關(guān)。

細胞內消化：對高等動(dòng)物而言細胞的營(yíng)養物質(zhì)主要來(lái)源于血液中的水分子物質(zhì)，而一些大分子物質(zhì)通過(guò)內吞作用進(jìn)入細胞，如內吞低密脂蛋白獲得膽固醇，對一些單細胞真核生物，溶酶體的消化作用就更為重要了。

細胞凋亡：個(gè)體發(fā)生過(guò)程中往往涉及組織或器官的改造或重建，如昆蟲(chóng)和蛙類(lèi)的變態(tài)發(fā)育等等。這一過(guò)程是在基因控制下實(shí)現的，稱(chēng)為程序性細胞死亡，注定要消除的細胞以出芽的形式形成凋亡小體，被巨噬細胞吞噬并消化。

自體吞噬：清除細胞中無(wú)用的生物大分子，衰老的細胞器等，如許多生物大分子的半衰期只有幾小時(shí)至幾天，肝細胞中線(xiàn)粒體的平均壽命約 10 天左右。

防御作用：如巨噬細胞可吞入病原體，在溶酶體中將病原體殺死和降解。

參與分泌過(guò)程的調節，如將甲狀腺球蛋白降解成有活性的甲狀腺素。

形成精子的頂體：頂體相當于一個(gè)化學(xué)鉆，可溶穿卵子的皮層，使精子進(jìn)入卵子。

FluoLysoTM 探針是一種用于活細胞溶酶體特異性標記的熒光探針，本品濃度為 1 mM。FluoLysoTM 探針可以選擇性地滯留在偏酸性的溶酶體中，從而實(shí)現對于溶酶體的特異性熒光標記。FluoLysoTM 探針適用于活細胞染色，但不適合用于固定后細胞的染色。

神經(jīng)元，也稱(chēng)為neurone或神經(jīng)細胞，是一種可電興奮的細胞，通過(guò)稱(chēng)為突觸的特殊連接與其他細胞通信。它是神經(jīng)組織的主要成分。除海綿和平口類(lèi)動(dòng)物之外的所有動(dòng)物都有神經(jīng)元，但其他多細胞生物如植物則沒(méi)有。

感覺(jué)神經(jīng)元對影響感覺(jué)器官細胞的觸覺(jué)，聲音或光等刺激作出反應，并向脊髓或大腦發(fā)送信號。

運動(dòng)神經(jīng)元接收來(lái)自大腦和脊髓的信號，以控制從肌肉收縮到腺體輸出的一切。

中間神經(jīng)元將神經(jīng)元連接到大腦或脊髓的同一區域內的其他神經(jīng)元。一組連接的神經(jīng)元被稱(chēng)為神經(jīng)回路。

突起:分為樹(shù)突與軸突兩部分

樹(shù)突:較短，分支較多，直接細胞體擴張突出形成樹(shù)枝狀，作用接受其他神經(jīng)元傳來(lái)的沖動(dòng)，并傳給細胞體

軸突:較長(cháng)，每個(gè)神經(jīng)元只有一個(gè)軸突，軸突末端有分支，能夠傳導細胞體發(fā)出的神經(jīng)沖動(dòng)

髓鞘:軸突的外圍，對于神經(jīng)具有保護作用

細胞體:神經(jīng)元主要結構，由細胞膜，細胞核，細胞質(zhì)組成，具有聯(lián)絡(luò )，整合、輸入信息，傳出信息的作用。

神經(jīng)末梢: 神經(jīng)纖維末端細小的分支，分布于全身各處

信息的傳遞方向:樹(shù)突→細胞體→軸突→下一個(gè)神經(jīng)元

長(cháng)的突起大都套有一層鞘，組成神經(jīng)纖維。

信號傳輸過(guò)程部分是電氣的，部分是化學(xué)的。由于維持其膜上的電壓梯度，神經(jīng)元是可電激發(fā)的。如果電壓在短時(shí)間內變化足夠大的量，則神經(jīng)元產(chǎn)生稱(chēng)為動(dòng)作電位的全有或全無(wú)電化學(xué)脈沖。這種潛力沿著(zhù)軸突快速傳播，并在到達它們時(shí)激活突觸連接。突觸信號可以是興奮性的或抑制性的，增加或降低到達體細胞的凈電壓。

神經(jīng)末梢探針是一系列陽(yáng)離子型苯乙烯基熒光染料，用于跟蹤神經(jīng)肌肉連接或突觸的突觸活動(dòng)。這類(lèi)染料通常具有親脂性尾部（兩個(gè)碳鏈）和帶陽(yáng)離子的高親水性頭部。

陽(yáng)離子苯乙烯基染料是通過(guò)活性依賴(lài)性染色突觸小泡來(lái)發(fā)揮功能。染料與細胞或組織共孵育時(shí)，染料的水相部分沒(méi)有熒光，而染料的親脂性尾部插入細胞膜并呈現強熒光。神經(jīng)刺激后，在進(jìn)行胞吞作用時(shí)，染料被包裹在囊泡內，因此，洗去細胞表面附著(zhù)的染料后，熒光信號強弱表示新形成的囊泡的數量的多少。反之，在胞吐作用時(shí)，染料與神經(jīng)遞質(zhì)一起從囊泡釋放，導致熒光信號減少。因此，熒光強度的變化反映了胞吞/胞吐或突觸活動(dòng)的情況。內吞過(guò)程中熒光增加的速率——“結合速率”和胞吐過(guò)程中熒光減少的速率 ——“解離速率”因染料種類(lèi)而異。通常，具有較長(cháng)親脂性尾部和更多雙鍵的染料對膜具有較高的親和力，因此具有較高的結合速率和較低的解離速率。

NerveRed 系列探針是具有三個(gè)雙鍵的染料。

NerveGreen 系列探針是具有單個(gè)雙鍵的染料。

NerveGreen C4（FM1-43）是一種廣泛使用的綠色熒光染料，通過(guò)染色突觸的突觸囊泡或神經(jīng)肌肉接頭來(lái)跟蹤突觸活動(dòng)。結合使用紅色熒光染料 NerveRed，突觸和神經(jīng)肌肉接頭可以獨立兩個(gè)顏色成像。

NerveRed/Green系列探針不能用于固定細胞染色。

NM 染料具有與NerveRed/Green系列探針相似的結構，此外，它們在帶正電的頭部具有醛固定胺，可用于固定細胞的染色。

Hydroxystilbamidine（也稱(chēng)為FluoroGold）已被廣泛用作神經(jīng)元的逆行示蹤劑和組織化學(xué)染色劑。FluoroGold可以進(jìn)行逆行軸突運輸，它顯示出大量的枝晶填充物，并且具有很高的抗褪色性。