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    百瑞極——離心柱法核酸提取試劑盒

    以往實(shí)驗室的核酸提取常用苯酚氯仿抽提法,但由于使用了苯酚、氯仿等試劑,毒性較大,長(cháng)時(shí)間操作對人員健康有較大影響,而且核酸的回收率較低,損失量較大,由于操作體系大,不同實(shí)驗人員操作重復性差,不利于保護核酸,很難進(jìn)行微量化的操作?,F在為大家介紹離心柱法核酸提取試劑盒產(chǎn)品。



    圖片

    離心柱法提取原理




    離心柱法核酸提取試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn):


    安全低毒:試劑盒基于硅膠柱純化技術(shù),提取過(guò)程中無(wú)需使用有毒的酚、氯仿抽提。


    操作簡(jiǎn)便:30~40 min 內完成數個(gè)樣品的DNA/ RNA 提??; 


    DNA提取試劑盒: 

    DNA純度高:提取的基因組 DNA 片段完整、純度高,可直接用 于下游 PCR 擴增、qPCR、分子標記以及文庫構建等實(shí)驗。


    RNA提取試劑盒:

    高效去除基因組 DNA:采用膜過(guò)濾及 DNase I 消化,高效去除基因組 DNA; 


    RNA 純度高:提取的 RNA 無(wú)雜質(zhì)殘留,適用于對純度、完整性要求很高的下游實(shí)驗。

    沒(méi)有蛋白和其他雜質(zhì)的污染,可直接 用于 RT-PCR、Northern Blot、Poly A 純化、核酸保護和體外翻譯等實(shí)驗。




    DNA提取常見(jiàn)問(wèn)題


    1.柱子出現堵塞?

    1) 樣品用量過(guò)多。建議按照說(shuō)明書(shū)推薦量進(jìn)行提??; 

    2) 樣品富含多糖多酚類(lèi)物質(zhì)。處理富含多糖多酚的組織,推薦用專(zhuān)用試劑盒; 

    3) 離心溫度過(guò)低。本產(chǎn)品使用操作均在室溫下進(jìn)行。 


    2.DNA 提取得率低?

    1) 樣品用量過(guò)少。建議按照說(shuō)明書(shū)推薦量進(jìn)行提??;

    2) 樣品材料質(zhì)量不好。盡量選用新鮮組織樣品,樣品采集后應液氮速凍,然后置于-80℃保存,建議 盡快提取,避免反復凍融; 

    3) 樣品裂解不充分。若樣品過(guò)量則適當減少樣品量,加入 Buffer GP1 后需渦旋振蕩 1min 使其充 分混勻,可適當延長(cháng)裂解時(shí)間。 


    3.提取的 DNA 中有 RNA 污染? 

    1) 未加入 RNase A 消化。請按照說(shuō)明書(shū)要求加入 RNase A 消化; 

    2) 樣品中 RNA 含量過(guò)多??蛇m當增加 RNase A 用量或延長(cháng)消化時(shí)間。



    RNA提取常見(jiàn)問(wèn)題


    1.柱子出現堵塞? 

    處理方法同DNA提取常見(jiàn)問(wèn)題Q1。


    2.提取的 RNA 出現降解? 

    1) 樣品用量過(guò)多。影響裂解液的裂解能力,造成 RNase 未被充分抑制,導致 RNA 降解,建議參考 說(shuō)明書(shū)推薦取樣量,若要增加樣品起始量,則后續實(shí)驗中各溶液量均要按等比例增加。對于內源 RNase 含量較多的組織應減少樣品量,適當增加裂解液用量; 

    2) 樣品保存不當。反復解凍會(huì )引起 RNA 降解,盡量使用新鮮樣品或者解凍次數不超過(guò) 2 次的樣品; 

    3) 操作過(guò)程中引入 RNase 污染。請使用 RNase-Free 的工具、試劑和耗材; 

    4) 電泳過(guò)程中發(fā)生降解。使用 RNase-Free 的 Loading Buffer、瓊脂糖和電泳緩沖液等。 


    3.RNA 得率低? 

    1) 樣品用量過(guò)多。樣品過(guò)量會(huì )影響裂解效果,建議按照說(shuō)明書(shū)要求適量取樣; 

    2) 樣品裂解不充分。請按照說(shuō)明書(shū)的要求進(jìn)行充分研磨、裂解; 

    3) 洗脫不充分。RNase Free H2O 需直接加到膜中央,并靜置 2 min 后再離心,必要時(shí)可進(jìn)行二次 洗脫以提高產(chǎn)量; 

    4) 吸附柱有乙醇殘留。使用 Buffer PRW1 漂洗后需要開(kāi)蓋晾干吸附柱中的乙醇。


    4.提取的 RNA 中有 DNA 污染? 

    1) 樣品用量過(guò)多。超出試劑盒規定的樣本量影響裂解液的裂解能力可能會(huì )導致基因組的污染; 

    2) 次生代謝物較多。次生代謝物含量高的樣本在提取 RNA 時(shí)易出現基因組的污染; 

    3) 操作過(guò)程中需要進(jìn)行去除基因組 DNA 的操作,若 DNA 含量較多,可延長(cháng) DNase I 消化時(shí)間或重復消化。



    核酸提取產(chǎn)品信息


    圖片


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    ※ 本頁(yè)面產(chǎn)品僅供研究用,研究以外不可使用。

     

    拜爾迪是 百瑞極 BIORIGIN 授權代理商,更多產(chǎn)品請咨詢(xún):

    北京拜爾迪生物技術(shù)有限公司

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