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    FUJIFILM Wako和光純藥質(zhì)譜級賴(lài)氨酰肽鏈內切酶

    質(zhì)譜級賴(lài)氨酰肽鏈內切酶

    Lysyl Endopeptidase

    本產(chǎn)品是質(zhì)譜分析前處理時(shí)最常用的蛋白分解酶即賴(lài)氨酰肽鏈內切酶，該酶可以特異性切除賴(lài)氨酸基團C末端的多肽，可用于蛋白測序分析和Lys-X化合物的酶合成。若同時(shí)使用賴(lài)氨酰肽鏈內切酶和胰酶，可更好地切斷賴(lài)氨酸 基團的多肽，增加多肽的數量。產(chǎn)品已按照使用習慣做成小包裝，是方便使用的冷凍干燥品。

    image.pngimage.png

    來(lái)源：細菌

    外觀(guān)：凍干粉（包含2 mmol/L Tris-HCl緩沖液，pH 8）
    活性：0.03～0.07 AU/vial
    分子量：27,000(瓊脂糖過(guò)濾)，30,000（SDS-PAGE）
    溶解性：溶于水或緩沖液
    穩定性：溶解于pH值5.0-12.0的Tris緩沖液中，可在4℃穩定保存2年；在pH值6.0-11.0 30℃時(shí)能穩定保存，但溫度超過(guò)50℃時(shí)不穩定。
    最適pH值：9.0~9.5
    等電點(diǎn)：6.9~7.0 
    底物特異性：
    可水解底物——Tos-Lys-OMe,Bz-Lys-NH2,Bz-Lys-pNA,Lys-pNA
    不可水解底物——Bz-Arg-NH2,Bz-Arg-pNA,Arg-pNA
    抑制劑：DFP，PMSF，TLCK

    ◆特點(diǎn)

    ●  高特異性、高蛋白質(zhì)消化率、適用于蛋白質(zhì)譜分析

    ●  提高裂解效率、增加肽段數量
    ●  根據使用量特意制備小包裝，方便使用

    ◆應用
    分別采用胰蛋白酶(Tp)、賴(lài)氨酰肽鏈內切酶 (Lys-C) 和Tp與Lys-C聯(lián)用進(jìn)行膠內酶切的效果比較。
    牛血清蛋白BSA 的條帶(100 ng) 通過(guò)SDS-PAGE 獲得，然后分別用Tp、Lys-C和Lys-C+Tp進(jìn)行酶切，再用MALDI-TOFMS法進(jìn)行分析。
    這些蛋白酶的實(shí)驗效果見(jiàn)下表。

    表 1：Tp、Lys-C和Lys-C+Tp的結果對照
    這些結果表明Lys-C酶解的錯誤裂解率最低。Tp酶解時(shí)加入Lys-C后，錯誤裂解率有所降低，同時(shí)，可以鑒定出更多的多肽。

    image.png

    胰蛋白酶 (Tp)( 圖 a) 和賴(lài)氨酰肽鏈內切酶 (Lys-C)+Tp ( 圖 b) 酶切后的質(zhì)譜結果對照圖。

    Lys-C+Tp酶切后，可以在m/z=2000時(shí)得到吸收峰，而單獨的Tp酶切在m/z=2000時(shí)沒(méi)有吸收峰。該結果表明Lys-C可以提高測序覆蓋度。
    ( 數據由大阪醫療中心和婦嬰健康研究所Y. Wada博士提供 )


    ◆賴(lài)氨酰肽鏈內切酶

    賴(lài)氨酰肽鏈內切酶，最初由Masaki 等人從土壤細菌中分離得到。該酶可以特異性剪切賴(lài)氨酸殘基C 末端和S-氨乙基半胱氨酸殘基的肽鍵，用于蛋白測序和Lys-X化合物的酶催化合成。該酶穩定性高，在4M 尿素或0.1%SDS 溶液中30℃孵育6小時(shí)之后，仍然擁有完整的生物活性。

    image.png

    ◆產(chǎn)品列表

    品牌編號產(chǎn)品名稱(chēng)規格產(chǎn)品等級
    FUJIFILM Wako125-05061賴(lài)氨酰肽鏈內切酶，MS級20 μg×5質(zhì)譜級


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