CEPT 由4種成分組成,取其組成成分(Chroman 1、Emricasan、Polyamines、Trans-ISRIB)的開(kāi)頭字母命名為“CEPT”。
研究 表明,CEPT可防止人ES/iPS細胞(人多能干細胞;hPSCs)在細胞傳代中的細胞應激和DNA損傷,還可提高細胞傳代
和凍 存時(shí)hPSCs的存活率。
Fujifilm wako 033-26071 CultureSure? CEPT Cocktail(1,000×)
01 特點(diǎn)
● 從DNA損傷等細胞應激中保護ES/iPS細胞,維持細胞結構與功能
● 已進(jìn)行過(guò)濾滅菌的即用型混合溶液
● 已通過(guò)內毒素測試以及支原體陰性檢測的CultureSure系列
02 測試項目
● 濃度(HPLC):已通過(guò)測試
● 外觀(guān):液體
● 內毒素:<3 EU/mL
● 已完成無(wú)菌測試
● 已完成支原體陰性測試
03 使用方法
以1/1,000的量添加本品至培養基,充分混合后使用。
※使用注意
● 本產(chǎn)品為凍存品(-20°C)。為避免反復凍融,建議根據使用量分裝凍存。
● 溶解時(shí)可能會(huì )出現沉淀,并非產(chǎn)品質(zhì)量問(wèn)題,請直接使用。(沉淀于37°C下靜置1~2 h可能會(huì )溶解,請避免反復冷凍和加熱。)
04 適用范圍
樣品:人ES/iPS細胞
應用:
05 性能數據
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure? hPSCΔ培養基,在37°C,5% CO2的條件下培養人iPS細胞201B7株(6孔板1 well=9.5cm2)。
培養經(jīng)過(guò)16 h以后,更換不含CEPT或Y-27632的培養基,每2~3天更換培養基,繼續培養。
培養第8天時(shí),確認細胞后,使用4%多聚甲醛固定細胞,ALP染色后,計數細胞集落。
單細胞克隆測試
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure? hPSCΔ培養基,在37°C,5% CO2的條件下培養人iPS細胞201B7株(96孔板)。
培養經(jīng)過(guò)16 h以后,更換不含CEPT或Y-27632的培養基,每2~3天更換培養基,繼續培養。
培養第13天時(shí),確認細胞后,使用4%多聚甲醛固定細胞,ALP染色后,計數形成細胞集落的孔數與空孔數。
通過(guò)所有孔數與細胞集落形成孔數之比,計算細胞集落形成率。
【結果】
細胞接種數少時(shí),添加CEPT的組比添加Y-27632的組形成的細胞集落更多。
未分化人iPS細胞的維持確認
【細胞株】人iPS細胞201B7株
【培養基】StemSure? hPSC培養基Δ+35 ng/mL bFGF
Red:rBC2LCN-635(人iPS細胞膜染色)
Blue:DAPI(細胞核染色)
※ BC2LCN是一種對存在與人ES/iPS細胞的膜表面的糖鏈具有高親和性的重組凝集素
【結果】
添加CEPT時(shí)與添加Y-27632時(shí)都未觀(guān)察到細胞形態(tài)的差異,均可確認未分化維持狀態(tài)。
產(chǎn)品列表
品牌 | 貨號 | 名稱(chēng) | 規格 |
Fujifilm wako | 033-26071 | CultureSure(TM) CEPT Cocktail(1,000×) | 300μL |