Matrigel matrix丨康寧基質(zhì)膠使用指南-1

14. Corning? Matrigel? matrix可以反復凍融嗎？

建議用戶(hù)第一次融化后按照單次用量進(jìn)行分裝，保存。

15. 為什么細胞沒(méi)有貼壁？Matrigel 也脫落了？

首先需要檢查細胞的接種濃度是否過(guò)高，Corning Matrigel的用量應等同于細胞培養體系中培養基的用量。如果Corning? Matrigel? matrix被稀釋到過(guò)低的濃度，形成的膠體容易從組織培養器皿表面分離。

16. 未稀釋的Corning? Matrigel? matrix中出現的沉淀應該怎么樣處理？

4°C下低速離心，去除沉淀物 。

17. 未使用完的Corning? Matrigel? matrix應該怎樣保存的？

與細胞培養基或緩沖液混合過(guò)但未使用完的Corning? Matrigel? matrix，不建議保留再用。

18. Corning? Matrigel? matrix中含有 DNA和/或RNA嗎?

是的。Corning? Matrigel? matrix沒(méi)有經(jīng)過(guò)DNA酶或RNA酶消化處理，可能會(huì )含有痕量的DNA、RNA。

19. Corning? Matrigel? matrix中有血管內皮生長(cháng)因子（VEGF）和金屬蛋白酶（MMPs）嗎?

在標準濃度的Corning? Matrigel? matrix中含有 5.0-7.5 ng/mL 的血管內皮生長(cháng)因子（ VEGF），GFR Corning? Matrigel? matrix中VEGF含量為1.0-1.5 ng/mL。另外，可能含有老鼠腫瘤細胞來(lái)源的痕量金屬蛋白酶（MMPs）。

20. Corning? Matrigel? matrix中有 LDEV嗎?

沒(méi)有的。Corning? Matrigel? matrix經(jīng)免疫方法及PCR方法檢測，并不含有乳酸脫氫酶增高病毒（LDEV）或者乳酸脫氫脢增生病毒（LDHV） 。此外，我們還針對小鼠群體及腫瘤來(lái)源篩查了其他種類(lèi)的病毒。詳細信息請參見(jiàn)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。

21. Corning? Matrigel? matrix中有尿素嗎?

沒(méi)有的。在Corning? Matrigel? matrix生產(chǎn)準備過(guò)程中使用過(guò)尿素，后續流程中經(jīng)過(guò)透析方法已經(jīng)去除了。

22. Corning? Matrigel? matrix中使用的什么緩沖液？

低葡聚糖 DMEM (1g/L)，其中包含 50 μg/mL 慶大霉素。

23. Corning? Matrigel? matrix 中含有纖維連接蛋白（Fibronectin）嗎？

是的，通過(guò)使用Western Blot檢驗，我們在Matrigel matrix中發(fā)現了微量的纖維連接蛋白（Fibronectin）

24. Corning? Matrigel? matrix 中含有玻璃體結合蛋白（ vitronectin）嗎?

某些EHS組織中可能含有微量的血液，因此Corning? Matrigel? matrix中可能會(huì )有痕量的玻璃體結合蛋白（Vitronectin） 。

25. Corning? Matrigel? matrix 中還有什么別的物質(zhì)？

Corning? Matrigel? matrix 中還可能含有濃度小于 0.02%的三氯甲烷，以及腫瘤細胞的產(chǎn)生的其他未知蛋白或分子。

26. 提取過(guò)程會(huì )引起層粘連蛋白變性嗎？

不會(huì )的，不會(huì )引起層粘連蛋白變性。

27. Corning? Matrigel? matrix 可以?xún)Υ嬖?-70℃嗎？

是的。Matrigel matrix 可以?xún)Υ嬖?70℃。建議客戶(hù)將整瓶的 Matrigel matrix 進(jìn)行分裝，儲存于聚丙烯或其他可以耐受超低溫條件材質(zhì)的小管中，方便保存和使用。

28. Corning? Matrigel? matrix 的折射率是多少？

20°C 條件下，Corning? Matrigel? matrix 的折射率是 1.3406 到 1.3407，相對折射率為1.0056（同等條件下，水的折射率為 1.333）。

29. Corning? Matrigel? matrix 會(huì )有自發(fā)熒光嗎？

Corning? Matrigel? matrix 是一種蛋白混合物，經(jīng)過(guò)透析處理后溶解在 DMEM 培養基中。為防止微生物污染，培養基中添加了慶大霉素。所以 Corning? Matrigel?matrix 可能引發(fā)熒光的組分包括其中的蛋白質(zhì)成分，維生素成分以及慶大霉素（氨基糖苷類(lèi)抗生素）。如果需要使用熒光檢測細胞生長(cháng)狀態(tài)，建議使用者建立對照實(shí)驗，在所需要的波長(cháng)條件下進(jìn)行對比，以便排除背景熒光。

30. 使用 Matrigel 培養的細胞，如果需要進(jìn)行切片或者免疫組織化學(xué)及免疫熒光檢驗，該怎樣固定呢？如何避免解聚？

可以使用 2%濃度的多聚甲醛進(jìn)行固定。為避免固定后出現解聚的情況，可以加入 1%濃度的戊二醛。戊二醛作為固定劑，常用于電鏡觀(guān)察。如果用戶(hù)需要進(jìn)行免疫熒光檢驗，加入戊二醛后，會(huì )出現明顯的背景熒光。為了解決這一問(wèn)題，我們建議用戶(hù)在固定之后，使用 NaBH4 進(jìn)行淬滅。NaBH4 極易氣泡，進(jìn)行該步驟時(shí)，必須在水平操作臺上小心操作，避免晃動(dòng)，盡量減少氣泡的形成。另外，用戶(hù)也可以嘗試使用較低濃度的戊二醛進(jìn)行固定，如 0.1%到 0.5%，濃度越低，背景熒光信號越少。

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