規格：裂解液100ml，PMSF 1.5ml 本產(chǎn)品配有 PMSF（100mM）

保存：RIPA 裂解液 4℃保存，PMSF -20℃保存。

規格:裂解液100ml，PMSF 1ml 本產(chǎn)品配有 PMSF（100mM）

保存：RIPA 裂解液 4℃保存，PMSF -20℃保存

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:RIPA組織/細胞裂解液是利用表面活性劑等來(lái)裂解細胞膜(包括核膜)。本試劑提取的蛋白為可溶性

總蛋白.

使用說(shuō)明:

如發(fā)現RIPA有沉淀，請放室溫半小時(shí)或者常溫水浴使沉淀溶解。

根據使用量，取每Iml RIPA加入10ul PMSF，使PMSF的最終濃度為1mM，混勻備用(PMSF現用現加).

1、樣品前處理:

a)對于貼壁細胞:去除培養液，用PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養液洗一遍。按照6孔板每孔細胞量加入150-250

u裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞:離心收集細胞，按照6孔板每孔細胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液，用手指輕

彈懸浮細胞以充分裂解。充分裂解后應沒(méi)有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成5-10x10細胞管，然

后再裂解.

c)對于組織樣品:把組織剪切成細小的碎片。按照每20mg組織加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液(如果

裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量).用玻璃勻

漿器勻漿，直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Westem

blotting 和免疫沉淀等操作。

注意事項:

1、使用本裂解液可以裂解細胞核，釋放出核蛋白的同時(shí)，也會(huì )將基因組一并釋放出來(lái)，造成細胞裂解液粘稠.

此時(shí)可以直接加入蛋白上樣緩沖液煮沸再離心，離心后直接上樣電泳;若想測定濃度，可入加少量SDS(1%),

煮沸后離心測濃度。

2、本系列蛋白提取試劑所提取的蛋白由于含有去污劑，所以不適合使用Bradford蛋白濃度測定試劑盒，請選擇

BCA法或者Lowry法檢測蛋白濃度。

3、如果需要檢測和基因組結合特別緊密的蛋白，則可以通過(guò)超聲處理打碎打散粘稠狀物，隨后離心取上清用于

后續實(shí)驗。

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