貨號
產(chǎn)品規格
售價(jià)
備注
BN12017-1 mL
1 mL
¥147.00
產(chǎn)品描述
產(chǎn)品規格:1 mL
應用范圍:實(shí)時(shí)定量 PCR
儲存條件
本產(chǎn)品 4 ℃避光保存。使用前,將產(chǎn)品室溫下解凍,并輕輕渦旋混勻,解凍后所有實(shí)驗應在冰上操作。該產(chǎn)品避免反復凍融。
產(chǎn)品介紹
SYBR Green I 是一種結合于 dsDNA 雙螺旋小溝區域的具有綠色激發(fā)波長(cháng)的熒光染料。SYBR Green I 與 dsDNA 結合熒光信號會(huì )增強 800-1000 倍,是一種常用的 qPCR 熒光染料。該染料經(jīng)濟實(shí)惠、使用方便,具有高靈敏度,信噪比高等優(yōu)勢,可應用于基因表達差異分析,基因芯片等。
使用方法:
1. 建立如下實(shí)驗體系:(僅供參考)
注:DNA 模板的添加量通常在 100 ng 以下。因不同種類(lèi)的 DNA 模板中含有的靶基因的拷貝數不同,必要時(shí)可進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)_定合適的 DNA 模板添加量。cDNA 作為模板時(shí)的添加量不要超過(guò) PCR 反應液總體積的 10%
2. 執行實(shí)時(shí)定量 PCR 程序,采集熒光信號。
3. 分析數據
注意事項
1. SYBR Green I 的使用濃度是保證熒光定量 PCR 實(shí)驗成功的關(guān)鍵因素。染料濃度過(guò)低會(huì )使熒光信號變化降低,導致低拷貝的樣品可能無(wú)法檢出,而在高濃度時(shí)又會(huì )抑制 PCR 反應。所以一般在使用 SYBR Green I 染料時(shí)應根據實(shí)際情況 優(yōu)化使用濃度,反應的終濃度為 1×到 0.2×之間。
2. 提高 Mg2+濃度可以降低 SYBR Green I 對 PCR 反應的抑制作用。我們建議在用 SYBR Green I 進(jìn)行熒光 PCR 反應時(shí), Mg2+濃度比無(wú) SYBR Green I 的普通 PCR 反應高出 0.5~3 mM。
3. 為了您的健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套進(jìn)行操作。